?性分析很關鍵的?項是流動相的選擇，?性分析?般都采?正相，使?最多的流動相是正?烷、正庚烷、?醇和異丙醇這四種，其中起洗脫作?的流動相是?醇和異丙醇，正?烷和正庚烷?來調(diào)節(jié)流動相的洗脫強度。正?烷和正庚烷對于樣品分離沒有什么太?的影響，不會改變選擇性和分離度，通常都可以混?，不過正庚烷?正?烷對?體的傷害要?很多，但價格是后者的?倍，所以歐美的很多?制藥公司多使?正庚烷，?國內(nèi)多使?正?烷。

?醇和異丙醇對樣品的分離起關鍵的作?，不同的醇有不同的選擇性，改變醇的種類可以改變選擇性，常?的醇類是?醇和異丙醇，甲醇不能使?是因為它和正?烷、正庚烷不互溶，叔丁醇粘度太?，?般作為添加劑配合?醇或者異丙醇少量使?，提供特殊的選擇性，通常能起到意想不到的效果。

流動相?經(jīng)常需要添加酸或者是堿來調(diào)節(jié)峰形，常?的酸有三氟?酸、?酸和甲基磺酸，堿?般是??胺和三?胺，也有??醇胺和異丁胺的，流動相?添加酸和堿的濃度?般要求控制在0.2%（體積?）以下，使?的原則?般是酸性樣品加酸，堿性樣品加堿，但實際上很多樣品是即含酸性基團?含堿性基團，這就要看哪個基團作?強了，對于某些含氨基的兩性樣品，例如苯?氨酸，甲基磺酸是?個?常好的選擇，磺酸基能夠抑制氨基的堿性，?能提供?個酸性的流動相環(huán)境，使樣品既能得到很好的分離?能獲得對稱的峰形。

?般做純度分析檢測雜質(zhì)含量時我們要求盡量的采?低波長來讓盡可能多的雜質(zhì)有紫外吸收，?做?性分析時我們需要采?盡可能?的波長來去除在低波長下才有吸收的雜質(zhì)的?擾，?般原則還是盡量選擇樣品紫外吸收zui 好的地?來獲得較?的靈敏度，但流動相?添加??胺會導致在低波長下基線波動變?，系統(tǒng)難以平衡，這種情況下?般要提?檢測波長，實際操作過程中有些樣品在?波長下吸收?常差，只能?低波長檢測，這樣的樣品可以嘗試在樣品稀釋的時候加?過量的??胺（但不宜太多），?流動相?中性，從?獲得滿意的分析結果。

有些樣品只添加堿或者酸效果不好，可以嘗試在樣品?同時添加酸或者堿，這樣的樣品我曾經(jīng)遇到過，只添加酸或堿樣品都拖尾，不能達到基線分離，這種情況下通過酸堿同時加?，最后獲得了?常漂亮的峰形和良好的分離度。實際操作中有些樣品堿性太強，進樣以后根本不成峰，低波長下細看似乎能感覺到基線?直在漂，開始時懷疑樣品濃度不夠，加?樣品濃度以后仍看不到樣品峰，流動相加???胺或三?胺以后再進樣，流動相?添加酸或者堿以后，基本上不會提供額外的選擇性，但是卻能提?分離度。